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    使用离心管二次离心法制备富血小板血浆的方法

    2021-02-19 11:13:31


    一、采集抗凝血的方法

    实验前动物常规饲养1周观察,一般情况,术前2d于9时由耳缘静脉采血0.5 mL,检测血常规,证实其为健康白兔。10%水合氯醛腹腔注射麻醉((2mL/mg)。用真空采血管在初次离心组兔耳背中央动脉采集2.7 mL抗凝血,混匀;另外采集0.5 mL抗凝血,测定原始血小板浓度作为对照。

    二、PRP制备的方法

    按表1所示离心条件进行初次离心,无菌条件下注射器吸取上部的血浆得到离心液,如果形成白膜,则首先吸取白膜之上的血浆,再将针头贴壁靠近白膜,在管壁0,4,8点钟位置,慢速轻柔吸取,每点吸取约0.05mL,连同白膜之上的血浆转移到另一无菌离心管中。密封:取离心液0.1 mL,加生理盐水0.9 mL稀释,测定血小板浓度,计算血小板收集率。

    同样方法采集再次离心组的抗凝血,以初次离心确定的血小板收集率较高的离心条件初次离心,制备并收集离心液到另一个无菌一次性离心管中;按表2所示离心条件再次离心,轻柔地慢速由上至下吸取上部离心液至另一离心管,底部剩余0.5 mL离心液轻轻吹吸,使血细胞重悬于剩余的血浆中,即得PRP。取PR P0.1mL,加生理盐水0.9 mL稀释,测定血小板浓度,计算PRP中血小板浓度。

    离心管.jpg


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