目前,新冠病毒抗体检测试剂盒分为刺突糖蛋白 S 或核衣壳蛋白 N 作为包被抗原。S 蛋白是病毒感染人体细胞的武器,SARS 冠状病毒和新冠病毒都是通过 S 蛋白结合呼吸道上皮细胞的血管紧张素转化酶 2,从而侵入肺组织,导致肺炎。新冠病毒 N蛋白与 SARS 冠状病毒 N 蛋白具有高度同源性, N 蛋白是冠状病毒中产生Z早且含量较多的蛋白质,具有很强的免疫原性和特异性,是抗体诊断材料的选项。但是 N 蛋白抗体基本上在发病 10 d 才开始大量产生,有研究认为 N 蛋白抗体作为早期诊断指标可能存在一定的不足。因此,市面上绝大多数抗体检测试剂盒选择重组 S 蛋白包被检测线。本研究选择的 6 种国产新冠快速检测试剂盒均为抗新冠病毒 S 蛋白IgG 抗体检测试剂盒。
通过研究结果可知:(1)新冠检测试剂盒 A 和 B 的检出限较低,但阳性符合率分别为 80.0%和 73.3%,不及检出限居中的试剂盒 C 和 E(阳性符合率均为 93.3%)。考虑以下几方面原因:①选择的国家标准物质是以新冠病毒重组刺突糖蛋白(S 蛋白)为免疫原筛选出的 IgG 单克隆抗体进行人源化改造的模拟人血清, 当试剂盒选择的特异性识别位点以及肽段长度接近于国家标准物质时,则检出限低;②有研究表明,重组蛋白诱导的免疫效率较低,可能与免疫途径相关。同时,选择的蛋白表达系统不同,也会影响试剂盒的阴性符合率、阳性符合率和检出限。③定性试剂盒的说明书中对检验方法的操作描述并不规范,比如,虽然样本稀释液都是 2 滴,但实际这 6 家生产厂家对 2 滴样本稀释液的具体体积解释Z低的约为 60 μL,Z高的约为 100 μL,跨度较大,对检出限的检测结果也有影响。
(2)试剂盒 D 的检出限Z低,且阳性符合率为 100.0%,阴性符合率也为 100.0%。试剂盒 D 为多点抓取,多种重组蛋白嵌合抗原覆盖的抗原表位比单一重组蛋白要多得多,而检出限Z高且阳性符合率为 73.3%的试剂盒 F 则为两点识别。因此,试剂盒 D 检测临床样本的阳性符合率和阴性符合率都更好。
(3)试剂盒 F 的检出限Z高,且阳性符合率为73.3%,阴性符合率为 100.0%,与其他试剂盒相比差异较大。分析除了上面提及的特异性识别位点不同、蛋白表达系统不同、样品稀释液的量值解释不同以外,上样量也是影响检出限检测结果的一个原因。有研究表明,上样量、样品稀释液、反应时间和检测环境均会对胶体金法检测试剂盒的检测结果产生影响[23-24]。试剂盒 F 说明书中关于上样量的描述是“吸管 1 滴”,不同操作者及手法、不同环境条件都会对上样量产生影响,从而影响检测结果。